【概述】 

      學(xué)習(xí)和記憶是大腦的**功能之一 , 學(xué)習(xí)是指經(jīng)驗(yàn)(行為習(xí)慣、感知、思維等) 的獲得或發(fā)展 ; 記憶則是經(jīng)驗(yàn)的保存和再現(xiàn)。它們是兩個(gè)不同而又密切聯(lián)系的神經(jīng)生物過(guò)程 , 一方面是思維和認(rèn)知的基礎(chǔ) , 另一方面又與腦的感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)功能密切相關(guān) ; 這一復(fù)雜過(guò)程至少包含了獲得、鞏固和再現(xiàn)三個(gè)主要階段。由于大鼠學(xué)習(xí)汜憶能力和人類(lèi)學(xué)習(xí)認(rèn)知的可比性, 故常用來(lái)進(jìn)行人類(lèi)學(xué)習(xí)記憶方面的研究。

     動(dòng)物空間記憶測(cè)試是研究動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶的*常用方法之一 , 由于水迷宮測(cè)試能有效地分離動(dòng)物空間辨認(rèn)與其它能力, 所以 , 以往甲低對(duì)仔鼠空間記憶影響的研究多采用此方法。但是 , 該實(shí)驗(yàn)測(cè)定的主要指標(biāo)為動(dòng)物在水迷宮中尋找**平臺(tái)所花的時(shí)間 (上臺(tái)潛伏期) , 它與動(dòng)物運(yùn)動(dòng)機(jī)能狀態(tài)密切相關(guān) , 凡能影響動(dòng)物運(yùn)動(dòng)機(jī)能的**和動(dòng)物本身狀態(tài)均可能影響該實(shí)驗(yàn)結(jié)果。甲狀腺**不僅對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有影響 , 也影響骨骼肌肉的發(fā)育 , 可能影響測(cè)試的結(jié)果。此外 , 動(dòng)物繞壁行走的天性也限制了它的應(yīng)用。八臂迷宮測(cè)試是動(dòng)物通過(guò)觀察周?chē)恍┕潭ǖ膮⒄瘴飦?lái)學(xué)習(xí)和記憶自身與餌 (置于迷宮臂末端的白色小食丸) 的相對(duì)位置 , 該方法可以有效地排除動(dòng)物由于自身運(yùn)動(dòng)機(jī)能障礙而對(duì)學(xué)習(xí)和記憶觀察指標(biāo)的影響 , 還可以同時(shí)分離和分析動(dòng)物 WME 與 RME。為此 , 本實(shí)驗(yàn)**采用八臂迷宮測(cè)定圍生期甲低仔鼠的空間記憶再現(xiàn)。研究發(fā)現(xiàn) , 與正常對(duì)照及**仔鼠比較 , 50 日齡甲低仔鼠 WME 增加 , 而 RME 無(wú)明顯改變。這種空間記憶的分離現(xiàn)象也可見(jiàn)于服用抗膽堿能**降低鼠海馬神經(jīng)元乙酰膽堿含量的八臂迷宮測(cè)試中, 然而海馬功能明顯受損引起 WME 和 RME 均增加。有關(guān) 甲低八臂測(cè)試中空間記憶分離現(xiàn)象以及具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。八臂迷宮、避暗實(shí)驗(yàn)對(duì)幼年大鼠學(xué)習(xí)與記憶的影響

【材料與方法】

1 　動(dòng)物模型制備及分組 　 復(fù)制甲低仔鼠模型, SD 雄性仔鼠納入研究 , 編號(hào) , 隨機(jī)抽取甲低組仔鼠于出生當(dāng)日起每天腹腔注射甲狀腺素 ( T 4) 2 μ g /100 g 體重至 21 日齡斷奶 , 為 T 4 替代**組 ( 20 只) ; 余甲低組仔鼠未予特殊處理 (20 只) ; 另設(shè)正常對(duì)照組仔鼠 (20 只) 。 21 日齡仔鼠斷奶 , 雄鼠每籠 3～4 只直至實(shí)驗(yàn)。自由進(jìn)水 , 每天給 12 h 光照 (光照時(shí)間 : 8 : 00～20 : 00) 。室溫 21 ± 2 ℃, 相對(duì)濕度40 %～60 % 。

2 　學(xué)習(xí)記憶研究

2.1 　避暗實(shí)驗(yàn) 　 測(cè)試 50 日齡各實(shí)驗(yàn)仔鼠。避暗測(cè)試箱( SFK2 I ) 型分明、暗兩室 , 其間有小門(mén)相通 ; 避暗習(xí)性使仔鼠本能地選擇進(jìn)入暗室 , 進(jìn)入暗室的仔鼠即刻遭受電擊(35 mV) 而被動(dòng)地逃回**的明室。 5 min 不進(jìn)入暗室則被認(rèn)為完成了學(xué)習(xí) , 記錄仔鼠在完成學(xué)習(xí)前錯(cuò)誤地進(jìn)入暗室的次數(shù) , 主要反映仔鼠近期學(xué)習(xí)的能力 ; 24h 后再次放回明室 , 記錄仔鼠由明室進(jìn)入暗室的時(shí)間 , 即為記憶潛伏期 ,主要反映仔鼠近期記憶的能力。

2.2 　八臂迷宮實(shí)驗(yàn) 　 測(cè)試 50 (60) 日齡各實(shí)驗(yàn)仔鼠。在進(jìn)行八壁迷宮實(shí)驗(yàn)前限制仔鼠飲食 , 使其體重維持在自由進(jìn)食體重的 80 %～85 % 。觀察在 10 : 00～17 : 00 進(jìn)行。采用放射狀八臂 (四臂放食物) 迷宮。迷宮中央?yún)^(qū)直徑 30 cm ,向四周以等角度和等長(zhǎng)度延伸八條臂 (50 cm × 12 cm , 圍以4.5 cm 高的墻) 。整個(gè)迷宮高出地面 40 cm。訓(xùn)練前仔鼠先在迷宮中適應(yīng) 2 d , 每天 1 次。適應(yīng)時(shí) 3 至 4 只仔鼠同時(shí)置于迷宮中 , 自由活動(dòng)和攝取食物 10 min 。適應(yīng)后進(jìn)行每天 1次的訓(xùn)練 , 共 10 d 。每次訓(xùn)練中 , 八臂中只有四臂放置了食物 (Bio2Serv , Frenchtown , NJ , USA ) , 分別為 1 、3 、5 和6 號(hào)臂 ; 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程均維持此順序。仔鼠放在迷宮中央?yún)^(qū) , 此時(shí)中央?yún)^(qū)四周用門(mén)關(guān)住 , 15 s 后將門(mén)打開(kāi) , 仔鼠可選擇進(jìn)入任意一臂 , 以攝取食物。仔鼠進(jìn)入有食物的臂且攝取了食物為 1 次正確選擇 , 否則為錯(cuò)誤選擇。記錄參數(shù)為錯(cuò)誤選擇的次數(shù)。重新進(jìn)入放食物臂稱(chēng)為工作記憶錯(cuò)誤(working memory error , WME ) , 進(jìn)入不放食物臂稱(chēng)為參考記憶錯(cuò)誤 ( reference memory error , RME ) 。

3 　統(tǒng)計(jì)處理 　 采用 SPSS i0.0 for Windows 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理。數(shù)據(jù)均以 x ±s 表示。組間、組內(nèi)比較用One -Way ANOVA 或獨(dú)立樣本的 t 檢驗(yàn)。八臂迷宮、避暗實(shí)驗(yàn)對(duì)幼年大鼠學(xué)習(xí)與記憶的影響

【結(jié) 果】

1 　避暗實(shí)驗(yàn) 　 同正常對(duì)照組及**組相比 , 50 日齡甲低組仔鼠在達(dá)到學(xué)會(huì)程度時(shí)所犯錯(cuò)誤次數(shù)多 , 差異有非常顯著性 ( P < 0.001) , **組錯(cuò)誤次數(shù)較正常對(duì)照組增多 , 但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 ( P > 0.05) 。 24 h 后甲低組仔鼠的記憶潛伏期*短 , 同正常對(duì)照及**組相比差異有非常顯著性 ( P <0.001) , **組潛伏期較正常對(duì)照組縮短 , 但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P > 0.05)  。

2 　八臂迷宮實(shí)驗(yàn) 　 與正常對(duì)照及**組相比 , 甲低組仔鼠RME 無(wú)明顯變化 ( P < 0.05) ; WME 明顯增加 ( P > 0.05) ;總的錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加 ( P < 0.05) ; 總的跑迷宮時(shí)間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 ( P > 0.05)。

【總結(jié)】

       探討甲狀腺功能低下 ( 甲低) 對(duì)幼年大鼠 (仔鼠)學(xué)習(xí)與記憶的影響。方法  孕SD雌鼠復(fù)制甲低仔鼠模型納入研究 ( n = 40) , 均為雄性 , 隨機(jī)選 20 只于出生當(dāng)日起每天腹腔注射 T4 2 μ g /100g 至斷奶 , 為 T4 替代**組 , 余 20 只甲低仔鼠未予特殊處理 , 另設(shè)正常對(duì)照組雄性仔鼠 20 只。對(duì) 50 日齡甲低組仔鼠行避暗及八臂實(shí)驗(yàn) , 并與同日齡正常對(duì)照及**組比較。結(jié)果 　 50 日齡甲低組仔鼠避暗實(shí)驗(yàn)中達(dá)到學(xué)會(huì)程度所犯錯(cuò)誤次數(shù)*多 , 24 小時(shí)后記憶潛伏期縮短 , 差異有顯著性 ; 50 日齡甲低組仔鼠八臂實(shí)驗(yàn)中參考記憶錯(cuò)誤無(wú)顯著性差異 , 工作記憶錯(cuò)誤增多 , 差異有顯著性 , 跑迷宮時(shí)間無(wú)顯著性差異。結(jié)論 　 甲低引起仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降。

　     目前 , 從整體水平研究動(dòng)物學(xué)習(xí)和記憶能力的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀泻芏喾N , 穿梭箱實(shí)驗(yàn)是其中之一 , 由于其操作簡(jiǎn)單、快捷 , 在學(xué)習(xí)和記憶實(shí)驗(yàn)中得到廣泛的應(yīng)用。為了消除皮質(zhì)**分泌節(jié)律性規(guī)律對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響 , 每天的實(shí)驗(yàn)均在同一時(shí)間段進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn) , 50 日齡甲低仔鼠學(xué)習(xí)時(shí)進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)增加 , 24 小時(shí)后的記憶潛伏期縮短 , 說(shuō)明圍生期甲低影響仔鼠近期學(xué)習(xí)記憶能力。但是 ,實(shí)驗(yàn)中使用的電刺激可能會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物興奮、不安 , 而且 ,動(dòng)物的自身運(yùn)動(dòng)量及對(duì)電刺激的敏感性等非學(xué)習(xí)記憶因素也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。  

    學(xué)習(xí)記憶與**神經(jīng)系統(tǒng)的突觸結(jié)構(gòu)和功能的可塑性密切相關(guān)。甲狀腺**可以通過(guò)調(diào)控多種腦結(jié)構(gòu)蛋白及信號(hào)蛋白的表達(dá) , 影響神經(jīng)細(xì)胞的增殖、遷移、分化、突觸的發(fā)育及髓鞘的形成等 , 影響了神經(jīng)元之間的信息傳遞 ,導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶等腦功能受損。本研究發(fā)現(xiàn)生后 T 4 替代**仔鼠學(xué)習(xí)記憶較甲低仔鼠有明顯改善 , 但未達(dá)到正常同齡仔鼠水平 , 說(shuō)明胎鼠甲低狀態(tài)已造成部分不可逆腦損傷。