高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)方法

（elevated plus-maze test, EPM）

一.實(shí)驗(yàn)原理

嚙齒類(lèi)動(dòng)物具有探究新環(huán)境的習(xí)性，但是又厭惡強(qiáng)光和開(kāi)闊地。EPM就是利用嚙齒類(lèi)動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究行為和對(duì)高懸著的開(kāi)臂的恐懼形成的矛盾沖突狀態(tài)，評(píng)價(jià)**的抗焦慮或致焦慮作用。EPM*初是由Montgomery在1955年的工作發(fā)展而來(lái)的。Pellow等人根據(jù)研究需要設(shè)計(jì)出了具有兩個(gè)開(kāi)臂和兩個(gè)閉臂的十字迷宮，并將迷宮抬高借以增加動(dòng)物進(jìn)入開(kāi)臂時(shí)的恐懼。高架十字迷宮是一個(gè)簡(jiǎn)單、快速、結(jié)果重復(fù)性好的焦慮檢測(cè)模型，因此廣泛應(yīng)用于抗焦慮**的研究與開(kāi)發(fā)。

二.實(shí)驗(yàn)裝置

    高架十字迷宮可以是木質(zhì)結(jié)構(gòu)，現(xiàn)在多為無(wú)味的塑料材質(zhì)，顏色為黑色。上海欣軟信息科技有限公司大鼠高架十字迷宮包括50cm*10cm的兩個(gè)相對(duì)開(kāi)臂（open arm）和兩個(gè)50cm*10*40cm的相對(duì)閉臂（closed arm），閉臂的上部是敞開(kāi)的。迷宮中央有一10cm*10cm的開(kāi)闊部，迷宮距離地面50cm高。迷宮上方安裝錄像監(jiān)控器，以錄制動(dòng)物在迷宮中的活動(dòng)情況，以供日后分析使用。

三.實(shí)驗(yàn)方法

1. 在實(shí)驗(yàn)前一個(gè)星期，每天撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1-5min，連續(xù)7天，借以消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼。

2. 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入迷宮中央?yún)^(qū)，頭朝開(kāi)臂，并注意此后每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均放在同一位置。同時(shí)開(kāi)啟攝像監(jiān)控器記錄5min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物開(kāi)臂和閉臂的進(jìn)入次數(shù)及進(jìn)入各臂的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)者需距離迷宮1米的距離。

3. 記錄結(jié)束后將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放回飼養(yǎng)籠具內(nèi)。同時(shí)清理迷宮，并用5%的醋酸水溶液或75%的酒精擦拭迷宮，借以消除動(dòng)物氣味對(duì)后繼實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。

四.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

主要應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：                        

1.開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比＝ 開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)/開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)＋閉臂進(jìn)入次數(shù)                          

2.開(kāi)臂滯留時(shí)間百分比＝ 開(kāi)臂滯留時(shí)間/開(kāi)臂滯留時(shí)間＋閉臂滯留時(shí)間

此兩指標(biāo)作為評(píng)價(jià)焦慮的指標(biāo)，通常這兩個(gè)指標(biāo)高度相關(guān)。如果一個(gè)**增加動(dòng)物對(duì)開(kāi)臂的偏愛(ài)（即增加進(jìn)入開(kāi)臂的次數(shù)和在開(kāi)臂內(nèi)滯留時(shí)間），卻不改變?nèi)氡劭偞螖?shù)和入臂總時(shí)間，也即開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比和開(kāi)臂滯留時(shí)間百分比升高，則認(rèn)為該**具有抗焦慮的作用。相反一個(gè)**如果減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)開(kāi)臂的偏愛(ài)，而入臂總次數(shù)和入臂總時(shí)間不變，則認(rèn)為該**具有致焦慮的作用。

五.注意事項(xiàng)

1. 為了提高大鼠入臂總次數(shù)，避免大鼠總是躲在閉臂中，通常在測(cè)試前先將大鼠放在開(kāi)闊場(chǎng)地（open field）中適應(yīng)5min后再放入迷宮。

2. 實(shí)驗(yàn)前一周每天撫摸大鼠可以明顯減少大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼感以及無(wú)關(guān)刺激對(duì)迷宮中大鼠的影響。

3. 盡管還沒(méi)有證據(jù)證實(shí)在**中不同時(shí)間對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有明顯的影響。但是結(jié)合本人實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)建議實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)時(shí)間*好在上午9:00至下午15:00之間進(jìn)行，如果有條件，且需要重復(fù)多次檢測(cè)，盡量在每天同一時(shí)間段檢測(cè)，以減少數(shù)據(jù)的波動(dòng)。

4. 如果實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從高架上跌落，*好將此動(dòng)物剔除?，F(xiàn)在的廠家生產(chǎn)的高架十字迷宮在開(kāi)臂的周邊加了一個(gè)小邊。但這樣會(huì)改變焦慮的性質(zhì)和降低抗焦慮**的敏感性。

5. 高架十字迷宮具有某些表觀信度，動(dòng)物不愿探究迷宮開(kāi)臂可能由于嚙齒類(lèi)動(dòng)物厭惡空曠區(qū)域和迷宮抬高引起的恐懼兩者共同作用的結(jié)果，目前尚不清楚這兩個(gè)因素哪個(gè)在致焦慮中占優(yōu)勢(shì)。

6. 進(jìn)入開(kāi)臂的次數(shù)和在開(kāi)臂停留的時(shí)間隨年齡的增長(zhǎng)而減少。因此年齡較大的大鼠抗焦慮的效果較弱，但是對(duì)于安定類(lèi)**的**反應(yīng)增強(qiáng)。

7. 高架十字迷宮*初用于雄性大鼠，但是也可用于雌性大鼠。但是所測(cè)定的行為有所不同。用雄性大鼠主要測(cè)定焦慮，而用雌性大鼠主要測(cè)定活動(dòng)性。

8. 除了大鼠，高架十字迷宮還用于小鼠，也有文獻(xiàn)報(bào)道用沙土鼠進(jìn)行檢測(cè)，但是存在明顯品系差異。

9. 迷宮設(shè)計(jì)時(shí)對(duì)開(kāi)臂的相對(duì)強(qiáng)光有所考慮。實(shí)驗(yàn)中建議高架十字迷宮光源避免直接照射在高架十字迷宮上，也需要避免光線不均勻的照射在各臂上?？稍诟呒苁置詫m周?chē)鷳覓炀哂幸欢ㄕ诠庑缘牟己熢斐擅詫m的周邊環(huán)境相對(duì)一致以及弱光照環(huán)境。