實(shí)驗(yàn)儀器
強(qiáng)迫游泳測(cè)試使用一個(gè)高 25至 50厘米、直徑10至 30厘米的圓柱形水箱來(lái)容納嚙齒動(dòng)物和小型靈長(zhǎng)類動(dòng)物。水箱中充滿室溫水,以防止對(duì)象將其爪子或尾巴接觸到圓柱體的地板并防止逃跑。不透明的分隔器通常在水箱內(nèi)使用,以允許多個(gè)受試者進(jìn)行測(cè)試。
雖然可以進(jìn)行實(shí)時(shí)評(píng)分,但建議使用視頻和跟蹤軟件,例如VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件(上海欣軟),以避免評(píng)分不準(zhǔn)確和差異。坦克必須有足夠的照明以提高記錄質(zhì)量,并且可以使用白噪聲發(fā)生器來(lái)掩蓋可能影響主體表現(xiàn)的任何噪聲。
實(shí)驗(yàn)方法
(1)實(shí)驗(yàn)前調(diào)節(jié)測(cè)試箱內(nèi)水溫,水溫應(yīng)為 23 ~25℃ 。水深應(yīng)根據(jù)動(dòng)物體重進(jìn)行調(diào)整,動(dòng)物尾巴與測(cè)試箱底面保持一定距離。
(2)如同時(shí)進(jìn)行多只動(dòng)物實(shí)驗(yàn),每?jī)芍粍?dòng)物間應(yīng)用不透明擋板隔開。
(3) 大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn),應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前1d預(yù)游,24h后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。記錄 5min內(nèi)動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間、游泳時(shí)間及攀爬時(shí)間。
(4)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn),應(yīng)在檢測(cè)當(dāng)天進(jìn)行,小鼠游泳時(shí)間應(yīng)為6min,記錄后 4min的游泳時(shí)間、不動(dòng)時(shí)間及攀爬時(shí)間。

評(píng)價(jià)指標(biāo)
評(píng)價(jià)指標(biāo)應(yīng)采用動(dòng)物不動(dòng)、攀爬、游泳三類動(dòng)作的時(shí)間及次數(shù)進(jìn)行判定。
(1)不動(dòng)( immobility):動(dòng)物在水中停止掙扎,呈漂浮狀態(tài),僅有輕微的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面。不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)表明抑郁程度越重。正常小鼠不動(dòng)時(shí)間在檢測(cè)時(shí)間的 40% ~ 80%內(nèi);正常大鼠不動(dòng)時(shí)間在檢測(cè)時(shí)間的 30% ~ 70%內(nèi);抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):不動(dòng)時(shí)間與對(duì)照組相比顯著性增加(P<0. 05)。
(2)游泳(swimming):動(dòng)物進(jìn)行流暢、協(xié)調(diào)的運(yùn)動(dòng),動(dòng)物四肢始終在水面以下。游泳時(shí)間和游泳距離越少,表明抑郁程度越重。
(3)攀爬( climbing):動(dòng)物四肢強(qiáng)有力伸出水面,并沿測(cè)試箱壁做劇烈的上下動(dòng)作。5min檢測(cè)期內(nèi),SD 大鼠攀爬時(shí)間 60 ~ 130s。攀爬時(shí)間越少,表明動(dòng)物抑郁程度越重。
注意事項(xiàng)
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不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在 FST中表現(xiàn)不一樣。瑞士小鼠對(duì) 作用于 5 -HT/NE神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的抗抑郁藥品zui敏感, 而抗抑郁藥品對(duì) DBA/2 小鼠無(wú)行為學(xué)效應(yīng), C57BL/6JRj品系小 鼠是唯1對(duì)安非他酮敏感的小鼠 。說明要做到研究結(jié)果的可比性, 必須選擇相同種系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
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盡管實(shí)驗(yàn)用鼠品種相似, 使用客觀評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn), 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 在 FST中表現(xiàn)仍有差異。
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實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)與條件, 包括飼養(yǎng)條件、光照時(shí)間對(duì)研究結(jié)果都有影響。
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在 FST中, 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為會(huì)受到水溫影響, 在冷水中容易出現(xiàn)靜止不動(dòng)行為;相反, 在溫度較高水中不動(dòng)行為出現(xiàn)較晚。所以通常將水溫設(shè)定在 23 ~ 25℃。
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水桶內(nèi)水的高度應(yīng)當(dāng)盡量保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的后肢不能支撐或者接觸到水桶底部
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計(jì)算動(dòng)物絕望狀態(tài)的行為,通常以動(dòng)物的后肢是否活動(dòng)為判斷依據(jù)
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實(shí)驗(yàn)時(shí)間不能太長(zhǎng),通常建議大鼠6min,小鼠5min左右
要點(diǎn)概括
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強(qiáng)迫游泳測(cè)試是由 Roger D. Porsolt 在 1970 年代后期開發(fā)的,作為一項(xiàng)簡(jiǎn)單的任務(wù),用于評(píng)估和評(píng)估小動(dòng)物中藥品和化合物的抗抑郁特性。
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該任務(wù)也被稱為行為絕望或習(xí)得性無(wú)助任務(wù),因?yàn)槭茉囌叱蔀楸硎窘^望的固定體。
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該任務(wù)使用一個(gè)裝滿水的圓柱形水箱,這樣當(dāng)對(duì)象被放入其中時(shí),它無(wú)法到達(dá)地板或逃離水箱。
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不動(dòng)包括平衡身體和保持頭部高于水面所需的任何行為。
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時(shí)間采樣技術(shù)將行為分為兩種類型:攀爬和游泳。這種技術(shù)提供了一種方便的方法來(lái)量化逃逸行為。
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當(dāng)用抗抑郁藥和其他化合物治liao時(shí),不動(dòng)行為會(huì)降低。
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