大鼠和小鼠抑郁行為檢測方法是基于興趣缺失、心境低落、絕望和無價值感為主要特征而設(shè)計的?？茖W(xué)家建立了多種行為實驗方法用于檢測動物的情緒行為改變。抑郁行為實驗方法主要包括糖水偏愛、新奇環(huán)境攝食抑制、新奇物體探索、曠場、強迫游泳、懸尾、獲得性無助等。

實驗介紹

獲得性無助實驗是指當大鼠接受連續(xù)無法控制或預(yù)知的厭惡性刺激(電擊)后，將其放在可以逃避電擊的環(huán)境中時，呈現(xiàn)出的逃避行為欠缺的現(xiàn)象，同時還伴有體重減輕、運動性活動減少、攻擊性降低等行為改變 。該實驗是評價抑郁行為一種比較理想的實驗方法 ，可廣泛應(yīng)用于抑郁發(fā)病機制研究，以及新藥、保健產(chǎn)品研發(fā)，在**醫(yī)學(xué)中也具有重要應(yīng)用價值。

實驗儀器

學(xué)習(xí)無助箱由透明的（或者黑色）有機玻璃制成一個有蓋的30cm*30cm*40cm的籠子，籠底由不銹鋼柵（1.5 cm 間隔）制成，側(cè)壁及頂蓋上均有通氣孔。籠底的不銹鋼柵可通電流，電流由發(fā)放命令的控制盒控制，一般發(fā)放的電流強度為0.8mA，持續(xù)1-15s，每1min 15 s給一次電擊(電擊持續(xù)時間和間隔時間均為隨機性的)。

實驗方法

本實驗主要分為模型的建立期和條件性回避反應(yīng)測試期：

(1)模型建立期

a：實驗當天動物應(yīng)放入測試箱(A室或 B室)中，適應(yīng)5min。

b：動物應(yīng)在電擊 箱內(nèi)接受30~60個運行周期的循環(huán)電擊。每個運行周期應(yīng)包括無信號不可逃避的雙室足底電擊期和間歇期，電擊時間應(yīng)為3~10s,間歇期時間應(yīng)為3~10s。電刺激頻率宜為5~15Hz,刺激電流強度應(yīng)為大鼠0. 65~1. 80mA,推薦 0. 8mA;小鼠0. 15~0. 6mA,推薦 0. 25mA。如采用電壓，大鼠應(yīng)為65~70 V,小鼠 30 ~ 36V。

上海欣軟SuperLH學(xué)習(xí)無助實驗（習(xí)得性無助測試）中，需要對動物加以聲刺激、光刺激以及電刺激等外部線索。
聲刺激：喇叭輸出，頻率可調(diào)，音量可調(diào)；
光刺激（可選）：LED光源，光強連續(xù)可調(diào)，12V2W，使用光刺激器時，需使用紅外濾光鏡和紅外照明；
電刺激：0～4mA恒流，0.01mA調(diào)整步長，64Hz正弦波刺激信號，9電極擾頻（交替）輸出，脈沖寬度30ms。

(2)條件性回避反應(yīng)測試期

a：模型建立結(jié)束 后第2天應(yīng)進行條件性回避反應(yīng)測試。

b：動物放入 測試箱(A 側(cè)或 B 側(cè))中，適應(yīng)5min后，進行15 ~ 30個運行周期的實驗。

c：每個運行周期的總時間 應(yīng)為30s,包括3~10s的條件刺激(燈光/ 聲音)、3~10s的條件刺激+非條件刺激(電擊條件同前)和 5~25s間歇期(不給以任何刺激)。

d：重復(fù)上述步 驟連續(xù) 2~3d。

(1) 逃避失敗次數(shù)(times of evasion failures)

動物在設(shè)定的非條件刺激持續(xù)時間內(nèi)未完成回避反應(yīng)的總次數(shù)；逃避失敗次數(shù)與動物的抑郁程度成正比。抑郁行為判斷標準：30次電擊，動物逃避失敗次數(shù)大于25次或者與對照組相比具有顯著性增加 (P < 0. 05)。

(2) 逃避潛伏期( escape latency)

實驗開始后， 動物第1次穿梭至對側(cè)測試箱的時間；逃避潛伏期與動物的抑郁程度成正比。抑郁行為判斷標準：逃避潛伏期大于15s 或者與對照組相比具有顯著性 增加(P < 0. 05)。

(3) 其他

主動回避次數(shù)、**區(qū)時間(無電區(qū)域)、運動總時間(實驗期間動物處于運動狀態(tài)的時間)、運動總路程(實驗期間動物物理位移的總和) 等實驗指標亦作為抑郁行為輔助評價指標。這些指標值越少，表明動物抑郁程度越重。

• 習(xí)得性無助范式是一種廣泛使用的抑郁癥模型，可用于轉(zhuǎn)基因、行為和藥理學(xué)研究。

• 它基于以下觀察結(jié)果：當面對不可避免的厭惡刺激時，動物會對新的厭惡但可逃避的壓力源產(chǎn)生隨后的應(yīng)對缺陷。

• 動物受到隨機的輕微電擊。無助的動物不會終止試驗或逃脫，而是接受不可避免的壓力源。

• 測試評分包括逃避或終止失敗的次數(shù)、在施加電擊后逃避或終止試驗的潛伏期、主動回避（在電擊期間退出或終止）和被動回避反應(yīng)（考慮到壓力源的預(yù)期）。

• 該協(xié)議可以進行調(diào)整以適應(yīng)研究的具體情況，并且已經(jīng)通過抗抑郁藥得到了一致的驗證。

引用參考

[1]姜寧[1],張亦文[1],姚彩虹[1],黃紅[1],劉新民[1],.大小鼠抑郁行為實驗方法概述[J].中國實驗動物學(xué)報，2021,29(6)

附：SuperLH習(xí)得性無助實驗系統(tǒng)特點

1、大鼠和小鼠

在學(xué)習(xí)無助實驗過程中，大鼠和小鼠表現(xiàn)出不同的狀態(tài)行為。SuperLH軟件可以同時應(yīng)用于大鼠和小鼠測試。

2、高通量

SuperLH學(xué)習(xí)無助實驗軟件支持1-16只動物同時開展實驗。所有的刺激方案可以預(yù)先設(shè)定，所有測試動物同時開始和同時停止刺激測試。

3、靈活性

用戶可以預(yù)先選擇刺激類型，如聲刺激、電刺激、光刺激以及聲電刺激組合等多種形式的刺激類型?？梢宰远x每種刺激的開始時間以及持續(xù)時長。

4、隨機性

用戶可以設(shè)置電流刺激大小為隨機值或者固定值。通過自定義每次刺激的間隔時長為隨機值等，實現(xiàn)無助模型測試的隨機原理。

5、電流恒流刺激

電流刺激范圍0--4mA，精度0.01mA，電流采用正弦波恒流刺激，九路循環(huán)杜絕電擊盲區(qū)。

6、聲音刺激

用戶可以設(shè)定聲音刺激的頻率和刺激大小，以及聲刺激的持續(xù)時長。

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